<?xml version="1.0"?>
<rdf:RDF xmlns:rdf="http://www.w3.org/1999/02/22-rdf-syntax-ns#" xmlns:dc="http://purl.org/dc/elements/1.1/"><rdf:Description rdf:about="https://repozitorij.uni-lj.si/IzpisGradiva.php?id=143818"><dc:title>Vpeljava elektroporacije pri genskem inženiringu nekompetentnih sevov Bacillus subtilis</dc:title><dc:creator>Valentinčič,	Brigita	(Avtor)
	</dc:creator><dc:creator>Štefanič,	Polonca	(Mentor)
	</dc:creator><dc:subject>Bacillus subtilis</dc:subject><dc:subject>elektroporacija</dc:subject><dc:subject>nekompetentni sevi</dc:subject><dc:subject>sorodstveno razlikovanje</dc:subject><dc:subject>horizontalen genski prenos</dc:subject><dc:description>Značilnost divjih sevov Bacillus subtilis je pogosto slabša naravna kompetenca oziroma nekompetenca za prevzem DNA. Za namen preučevanja takšnih sevov je potrebno razviti orodja genetske manipulacije, s katerimi lahko dosežemo vgradnjo željenih odsekov DNA. Eno od možnosti priprave rekombinantnih sevov predstavlja metoda elektroporacije, ki je bila predmet raziskav našega magistrskega dela. Izvedli smo številne poskuse optimizacije metode, pri čemer smo testirali različne načine priprave elektrokompetentnih celic in parametre elektroporiranja. Začetni poskusi elektroporacije naravno kompetentnih sevov B. subtilis 168 trpC2 in PS-216 wt so bili uspešni, elektroporacija naravno nekompetentnih sevov pa se je izkazala za izredno težavno, saj nam metode ni uspelo optimizirati. Iz tega razloga smo v eksperimentalno delo uvedli pripravo rekombinantnih sevov s fagno transdukcijo. Uspelo nam je pripraviti mutante naravno nekompetentnih sevov, ki smo jih nato uporabili pri raziskavi izmenjave DNA med različno sorodnimi sevi pri rojenju na poltrdnem mediju B. Seve smo označili z genom za antibiotično odpornost in fluorescentnim markerjem. Testirali smo prenos DNA med tremi kombinacijami nesorodnih (»non-kin«) sevov in med izogeno kombinacijo. Do povišanega prenosa DNA je prišlo pri eni izmed testiranih »non-kin« kombinacij. Pri izogeni kombinaciji do prenosa DNA ni prišlo. Ugotovitev nakazuje na možnost horizontalnega genskega prenosa med sevi zaradi sorodstvenega razlikovanja in posledične indukcije kompetence pri sicer naravno nekompetentnih sevih.</dc:description><dc:publisher>[B. Valentinčič]</dc:publisher><dc:date>2023</dc:date><dc:date>2023-01-13 07:15:31</dc:date><dc:type>Magistrsko delo/naloga</dc:type><dc:identifier>143818</dc:identifier><dc:language>sl</dc:language></rdf:Description></rdf:RDF>