Načrtovanje, sinteza in vrednotenje derivatov 4'-O-benziltiramina kot kovalentnih zaviralcev monoamin oksidaze BKavaš, Vid (Avtor) Knez, Damijan (Mentor) Meden, Anže (Komentor) monoamin oksidaza Btarčni kovalentni zaviralci usmerjeni proti lizinuderivati 4`-O-benzil tiraminaelektrofilne bojne glaveTarčni kovalentni zaviralci so spojine, ki se kovalentno vežejo na specifično tarčo in zavrejo njeno biološko delovanje. Zaželeno je, da se del molekule, odgovoren za selektivno nekovalentno vezavo z visoko afiniteto, veže v aktivno mesto encima, da lahko šibko elektrofilna glava molekule tvori vez z nukleofilom v bližini ter tako kovalentno zavre encim. Tarčni kovalentni zaviralci običajno ciljajo tiolno skupino cisteina, vendar zaradi nizke zastopanosti le-tega v proteinih razvijajo tarčne kovalentne zaviralce, ki ciljajo druge nukleofilne ostanke, najpogosteje lizin, serin, treonin, aspartat in glutamat. Lizin vsebuje primarni amin, ki lahko reagira z elektrofilno bojno glavo, vendar je v fizioloških pogojih skoraj vedno protoniran in tako ni na voljo kot nukleofil. Da lahko uspešno ciljamo lizinske preostanke, morajo le-ti imeti dovolj nizko vrednost pKa, da so vsaj v določenem deležu v neprotonirani obliki. V sklopu magistrske naloge smo se osredotočili na razvoj selektivnih zaviralcev monoamin oksidaze B (MAO-B). Cilj je bil razvoj tarčnih kovalentnih zaviralcev, ki ciljajo nekatalitični lizin 296 v aktivnem mestu encima, saj ima ε-amino skupina Lys296 izračunano vrednost pKa enako 7,3. Izhajali smo iz 4`-O-benzil tiramina, ki vsebuje benziloksi farmakofor, značilen za selektivne zaviralce MAO-B. Med sintezo načrtovanih zaviralcev MAO-B smo uporabili klasične pristope za sintezo organskih molekul. Elektrofilne bojne glave smo vezali na osnovni skelet z alkiliranjem amina ali pa z uporabo aktiviranih oblik kislin (karboksilne ali sulfonske) in tako tvorili sečnine, amide, estre in tioestre. Pripravili smo 31 derivatov 4`-O-benzil tiramina in z biokemijskimi testi preverili njihovo zaviralno delovanje na MAO-A in MAO-B. Spojine 12, 24, 28a, 34, 42, 43b, 46 in 47b so zavirale MAO-B z IC50 vrednostmi, nižjimi od 100 nM. Kot pomembne bojne glave smo prepoznali karbamoil in sulfamoil fluoride, nitrile, imidazolide in 1,2,3-triazolide. Čeprav so nekateri pripravljeni derivati močneje zavirali MAO-B, je za nadaljnjo optimizacijo najbolj obetavna spojina 28a, saj ima od spojin, ki nakazujejo na kovalentno vezavo (24, 28a, 28b), najnižjo vrednost IC50.20222022-09-07 07:45:02Magistrsko delo/naloga139736sl