Moduliranje sinteze protimikrobnih učinkovin pri bakteriji Bacillus subtilisVozelj, Anže (Avtor) Danevčič, Tjaša (Mentor) Bacillus subtilisprotimikrobne učinkovinesekundarni metabolitibacilensurfaktinŠirjenje odpornosti proti obstoječim protimikrobnim učinkovinam predstavlja vedno večji svetovni problem, zato je nujno iskanje alternativnih, doslej še neraziskanih virov protimikrobnih učinkovin. Zanimiv sistem za preučevanje predstavlja rizosfera, s hranili bogato ozko področje okrog korenine, kjer najdemo posebno skupino bakterij, t.i. bakterije PGPR (ang. Plant Growth Promoting Rhizobacteria), ki pozitivno vplivajo na rast in donos rastlin. Mednje se uvršča tudi bakterija Bacillus subtilis, ki je predmet raziskav našega magistrskega dela, kjer smo pripravili mutante bakterije B. subtilis z izbrisom genov, ki so vključeni v sintezo surfaktina in bacilena. Ker je sekundarni metabolizem energetsko zelo zahteven, smo želeli preučiti, kako okvara biosintezne poti za sintezo bacilena, vpliva na sintezo surfaktina in obratno. V ta namen smo promotor gena za sintezo surfaktina (srfAA) in bacilena (pksC) spojili z genom za rumeni fluorescenčni protein (yfp). Meritve izražanja omenjenih konstruktov na mikročitalcu potrjujejo postavljeno hipotezo, da okvara biosintezne poti za bacilen vodi k večjemu izražanju promotorja gena za surfaktin in obratno. S surfaktinskim kapljičnim testom smo pokazali, da bacilenska mutanta producira količinsko več surfaktina, kar potruje hipotezo o pozitivni korelaciji med nivojem prepisovanja in prevajanja. Na primeru bacilena smo s konfokalno lasersko mikroskopijo pokazali, da je izražanje promotorja gena pksC v populaciji heterogeno, saj je za njegovo povečano produkcijo specializiran le del bakterijske populacije.[A. Vozelj]20222022-09-01 07:15:03Magistrsko delo/naloga139161sl