Sprememba fenotipa asimilacije sladkorjev v lokalnih izolatih kvasovk z usmerjeno evolucijoRužič, Katja (Avtor) Petković, Hrvoje (Mentor) Tome, Miha (Komentor) kvasovkeproizvodnja pivaporaba sladkorjevglukozamaltozausmerjena evolucijamutagenezaZa uporabo lokalnih izolatov kvasovk v pivovarski industriji je značilna njihova slabša asimilacija alternativnih sladkorjev, kar neposredno vpliva na učinkovitost in hitrost fermentacije v procesu proizvodnje piva. Maltoza, ki se običajno pri kvasovkah v prisotnosti glukoze slabo asimilira zaradi katabolne represije, na koncu fermentacije ostane pretežno neporabljena. Namen tega magistrskega dela je bil z uporabo usmerjene evolucije in mutageneze pripraviti mutante lokalnih izolatov, ki bodo odporne na 2-deoksiglukozo (2-DOG). 2-DOG je antimetabolit glukoze, ki vpliva na glikolizo, ter s tem posredno prisili celico, da aktivira sisteme za porabo alternativnih virov sladkorjev. Glavni cilj magistrskega dela je odpraviti katabolno represijo z glukozo pri dveh izolatih kvasovk vrste Saccharomyces cerevisiae in S. paradoxus in/ali izboljšati privzem maltoze. V prvem delu naloge smo za oba seva določili minimalne inhibitorne koncentracije za 2-DOG na definiranem gojišču z maltozo ter krivulje preživetja pri izpostavitvi mutagenu. V drugem delu je sledila usmerjena evolucija z mutagenezo, s katero smo pridobili mutante odporne na 2-DOG oz. kolonije, ki so kazale hitrejšo rast pri višjih koncentracijah 2-DOG, kot na kontrolnih ploščah brez mutagena. Izbrane mutante smo testirali in s pomočjo HPLC analize določili hitrost porabe glukoze, maltoze in produkcijo etanola ob izbranih časovnih točkah. Ugotovili smo, da smo pri določenih mutantih S. cerevisiae uspeli odpraviti katabolno represijo z glukozo, saj so sevi spremenili fenotip porabe sladkorjev glede na kontrolni sev.[K. Ružič]20222022-08-31 07:15:54Magistrsko delo/naloga139103sl