Prilagoditev izolatov kvasovk iz Vipavske doline za fermentacijo pivine z usmerjeno evolucijoPavliha, Eva (Avtor) Čadež, Neža (Mentor) Tome, Miha (Komentor) kvasovkeSaccharomyces cerevisiaeLachancea thermotoleransproizvodnja pivafermentacija pivineporaba sladkorjevglukozamaltozausmerjena evolucijamutagenezaselekcijski pritiskV magistrski nalogi smo želeli prilagoditi lokalna izolata kvasovk Saccharomyces cerevisiae in Lachancea thermotolerans na pivovarsko okolje z metodo usmerjene evolucije. Namen poskusa je bila izboljšava sevov za fermentacijo pivine preko odprave katabolne represije z glukozo in izboljšanje privzema maltoze in maltotrioze. V prvem delu naloge smo optimizirali parametre mutageneze za obe kvasovki, na podlagi katerih smo potem izvedli mutagenezo z etilmetansulfonatom in z UV svetlobo. Sledilo je nacepljanje na trdno gojišča z inhibitorjem katabone poti glukoze, 2-deoksiglukozo, s katero smo ustvarili selekcijski pritisk. Z obema mutagenoma smo uspešno pridobili mutante, ki so bile odpornejše na inhibitor in so domnevno preferenčno sprejemale maltozo. Drugi del naloge je obsegal selekcijo mutant divjih sevov, potrjevanje njihovega spremenjenega fenotipa kinetike privzema glukoze in maltoze glede na divji sev med fermentacijo pivine, ter kemijsko analizo piv z visokotlačno tekočinsko kromatografijo. Pri ovrednotenju fermentativnih in tehnoloških lastnosti dobljenih mutant smo dobili mutante obeh vrst kvasovk, ki so bile odporne na inhibitor 2-deoksiglukozo, ter so s tem imele odstranjeno represijo z glukozo, in so zato hitreje privzemale maltozo.[E. Pavliha]20222022-07-09 07:16:11Magistrsko delo/naloga138073sl