Povezava kazalnikov oksidativnega stresa z aktivnostjo kronične vnetne črevesne bolezni pri zdravljenju z ustekinumabomKralj, Manca (Avtor) Vovk, Tomaž (Mentor) Tratenšek, Armando (Komentor) kronična vnetna črevesna bolezenCrohnova bolezenulcerozni kolitiskazalniki oksidativnega stresaustekinumabIncidenca in prevalenca kronične vnetne črevesne bolezni rasteta. Diagnoza bolezni je pogosto zakasnjena, saj so simptomi nespecifični, s tem pa je povezana slabša kakovost življenja bolnikov in večja možnost zapletov. Trenutno uporabljene diagnostične metode so invazivne in drage, s čimer narašča potreba po odkritju novih bioloških kazalnikov in razvoju novih metod. Za izbrane kazalnike oksidativnega stresa smo preverili, ali se njihove vrednosti razlikujejo med bolniki v aktivni fazi in remisiji. Za določanje prostih tiolov in naprednih oksidiranih proteinskih produktov smo uporabili neseparacijske spektrofotometrične metode, malondialdehid pa smo, po predhodni derivatizaciji z dinitrofenilhidrazinom, določili s separacijsko metodo tekočinske kromatografije visoke ločljivosti z ultravijoličnim detektorjem. Metodi določanja naprednih oksidiranih proteinskih produktov in prostih tiolov smo delno validirali. V območju od 10-100 µmol/L za proste tiole in 100-900 µmol/L za napredne oksidirane proteinske produkte nam metodi dajeta točne in ponovljive rezultate. Zaradi omejene količine biološkega vzorca smo metodo določanja malondialdehida optimizirali za manjše volumne. V raziskavo je bilo vključenih 49 bolnikov s kronično vnetno črevesno boleznijo na terapiji z ustekinumabom, vzorci pa so bili odvzeti v dveh časovnih točkah (ob času 0 in 24 tednov). Na podlagi endoskopske aktivnosti bolezni, določene z indeksom SES-CD ter s fekalnim kalprotektinom, smo primerjali vrednosti kazalnikov pri bolnikih z aktivno boleznijo ter tistih v remisiji. Vrednosti malondialdehida in oksidiranih proteinskih produktov so bile višje v plazmi bolnikov z aktivno kronično vnetno črevesno boleznijo kot pri tistih v remisiji, vendar razlike niso bile statistično značilne. Med skupinama nismo zaznali razlik v vrednostih prostih tiolov. Opazili smo zelo šibko pozitivno korelacijo med fekalnim kalprotektinom in C-reaktivnim proteinom z malondialdehidom in naprednimi oksidiranimi proteinskimi produkti. Na podlagi naših rezultatov je diagnostična moč testov za napredne oksidirane proteinske produkte, proste tiole in malondialdehid prenizka za uporabo v kliničnem okolju. Glede na opažen trend v razlikah v koncentracijah med aktivno in neaktivno fazo bolezni so smiselne nadaljnje raziskave o povezavi kazalnikov oksidativnega stresa in aktivnosti kronične vnetne črevesne bolezni.20222022-07-08 08:45:26Magistrsko delo/naloga138049sl