Model izražanja genov po genski elektrotransfekciji z električnimi impulzi različnih dolžinPANIĆ, DAMJANA (Avtor) Maček Lebar, Alenka (Mentor) transfekcijagenska elektrotransfekcijaelektroporacijamatematično modeliranjeGenska elektrotransfekcija je biotehnološka metoda, ki za vnos genskega materiala v biološke celice izkorišča pojav elektroporacije. Celice izpostavimo kratkim visokonapetostnim električnim impulzom, ki povzročijo začasno povečano prepustnost celične membrane in na ta način olajšajo vstop genskega materiala v celice. V magistrskem delu smo se posvetili modelu, s katerim lahko izračunamo število pDNK v celici in celičnih podstrukturah ob določenem času. Število pDNK molekul, ki vstopa v celico, ni za vse celice enako. Odvisno je od lokacije celice in pDNK molekul v transfekcijskem pufru ter aktivnosti celičnih podstruktur. Model predvideva, da se za vstop molekul pDNK v celico in transport po njej izkorišča endocitoza. Kot rezultat modela dobimo število pDNK molekul v celičnih podstrukturah. [1] Eksperimenti so bili izvedeni na celični liniji, pridobljeni iz ovarija kitajskega hrčka (CHO-K1). Kot pDNK pa so uporabili pEGFP-N1, ki kodira zeleni fluorescentni protein (GFP). Iz meritev fluorescence skupkov pDNK molekul na celični membrani in meritev fluorescence v jedru celic smo izračunali delež pDNK molekul. Eksperimentalne rezultate smo primerjali z rezultati modela. Določil smo tudi vse hitrostne konstante modela tako, da se krivulja, ki predstavlja število pDNK molekul v jedru, prilega časovnemu poteku genske ekspresije.20222022-06-24 10:05:07Magistrsko delo/naloga137661sl