Merjenje aktivacije limfocitov B po spodbujanju s CpG pri diagnostiki specifičnih imunskih pomanjkljivostiKerin, Ana (Avtor) Ihan, Alojz (Mentor) Kopitar, Andreja Nataša (Komentor) limfociti Bproliferacija limfocitov Baktivacija limfocitov BCpGEdUpretočni citometermolekularna imunologijamolekularna diagnostikaVeč kot polovica primarnih imunskih pomanjkljivosti je povezana z motnjo tvorbe protiteles, pri čemer so mehanizmi za pojav bolezni še vedno zelo neraziskani. Prvi znaki se najpogosteje izrazijo že v otroštvu, zgodnja diagnoza pa je pomembna za začetek primerne terapije in s tem preprečitev pojava težjih okužb. Funkcijski testi aktivacije limfocitov B so pomembni za ocenjevanje stanja humoralnega imunskega sistema pri bolnikih s primarno imunsko pomanjkljivostjo. Na podlagi in vitro funkcijskega testa, s katerim določamo proliferacijski potencial, diferenciacijo v plazmablaste in izločanje imunoglobulinov po stimulaciji limfocitov B s CpG, lahko zanesljivo ocenimo sposobnost aktivacije limfocitov B. CpG aktivira limfocite B po od limfocitov T neodvisni poti. Proliferacijo določimo z merjenjem vgraditve fluorescenčno označenega EdU v DNA delečih se celic. Dokazali smo, da pri zdravih posameznikih limfociti B po stimulaciji proliferirajo, se diferencirajo v plazmablaste in izločajo imunoglobuline. Pri bolnikih z diagnozo primarne imunske pomanjkljivosti pa je proliferacija limfocitov B, diferenciacija v plazmablaste ali proizvodnja imunoglobulinov znižana ali popolnoma odsotna. Z namenom vpeljave in vitro funkcijskega testa v rutinsko izvajanje smo določili optimalne pogoje za stimulacijo limfocitov B s CpG. Določili smo normalne vrednosti proliferacije celokupnih, naivnih, spominskih limfocitov B in plazmablastov pri zdravih posameznikih za skupino odraslih in otrok.[A. Kerin]20222022-05-21 07:15:12Magistrsko delo/naloga136793sl