Imunski odziv in funkcionalnost Toll-u podobnih receptorjev pri bolnikih s klopnim meningoencefalitisom, cepljenih proti tej bolezniMarušić, Miša (Avtor) Avšič Županc, Tatjana (Mentor) klopni meningoencefalitisvirus klopnega meningoencefalitisaToll-u podobni receptorjiimunski odzivdendritične celicecitokinikemokinicepivo proti KMEKlopni meningoencefalitis (KME) je virusna bolezen centralnega živčnega sistema (CŽS), ki jo povzroča virus klopnega encefalitisa (KMEV). Najbolj učinkovita zaščita pred KME je cepivo, vendar nekateri posamezniki zbolijo kljub cepljenju. Cepljeni bolniki s KME so v primerjavi z necepljenimi starejši, imajo enofazni potek bolezni in razvijejo hujše bolezenske znake. Zaradi vse več dokazov o vpletenosti imunskega sistema v patološke manifestacije KME, smo z doktorsko nalogo želeli raziskati, ali se funkcionalnost Toll-u podobnih receptorjev (TLR) 3, 7 in 8 ter aktivacija imunskega sistema pri bolnikih s KME, ki zbolijo kljub cepljenju proti bolezni, razlikuje od necepljenih bolnikov s KME. Z genotipizacijo enonukleotidnih polimorfizmov (SNP), povezanih s funkcionalnostjo TLR, smo ugotovili, da je frekvenca divjega alela za TLR8 pri cepljenih bolnicah s KME višja kot pri necepljenih bolnicah, zato bi lahko funkcionalni TLR8 predstavljal dejavnik tveganja za pojav KME kljub cepljenju. S stimulacijo mononuklearnih celic iz periferne krvi (PBMC) cepljenih in necepljenih bolnikov s KMEV in vitro smo poskusili poustvariti dogajanje v začetni fazi patogeneze KME. Ugotovili smo, da se cepljeni in necepljeni bolniki s KME ne razlikujejo po izražanju površinskih aktivacijskih molekul na dendritičnih celicah, smo pa pri cepljenih bolnikih s KME v zgodnjih časovnih točkah in vitro simulacije izmerili statistično značilno nižje koncentracije citokinov IFN-α, IL-12p70 in IL-15, kar bi lahko omogočilo obsežnejše virusno razmnoževanje in vodilo v šibkejšo aktivacijo drugih imunskih celic ter nižji protitelesni odziv. Po drugi strani pa smo v pozni točki in vitro stimulacije izmerili višjo koncentracijo IL-6, ki bi lahko ojačala vnetni odziv in prispevala k porušenju krvno-možganske pregrade. V kliničnih vzorcih cepljenih bolnikov s KME, odvzetih v nevrološki fazi bolezni, smo izmerili sistemsko povišane koncentracije vnetnih citokinov. Večina vnetnih citokinov, povezanih s prirojenim in Th1 celičnim odzivom, je bila koncentrirana v likvorju in je pozitivno korelirala z imunskimi celicami, kar kaže na lokalizacijo Th1 in vnetnih odzivov v CŽS. Cepljeni bolniki s KME so imeli še posebej izrazito povišan VEGF-A, ki bi lahko povzročil obsežnejše porušenje krvno-možganske pregrade in omogočil vstop imunskih celic v CŽS ter tako prispeval k oblikovanju intratekalnega vnetnega žarišča in k težjemu poteku bolezni. Obenem so imeli cepljeni bolniki s KME še dva meseca po pojavu nevroloških simptomov sistemsko povišane vrednosti IL-8/CXCL8 in GROα/CXCL1, kar kaže na dolgotrajno aktivacijo imunskega sistema. Obsežnejši in dlje časa trajajoč vnetni odziv pri cepljenih bolnikih s KME nakazuje na vpletenost imunskega odziva v pojav in potek bolezni pri tej skupini bolnikov s KME, vendar so za podrobnejše razumevanje mehanizma, ki leži za pojavom bolezni kljub cepljenju, potrebne še dodatne raziskave.20222022-03-03 07:15:08Doktorsko delo/naloga135251sl