Optimizacija protokolov imunocitokemičnih reakcij za vzorce, shranjene v različnih transportnih medijih in pripravljene s kompletom BD Totalys SlidePrepCerar, Špela (Avtor) Kloboves Prevodnik, Veronika (Mentor) citologijaimunocitokemijatekočinska citologijaoptimizacija protokolovcelični označevalciZ imunocitokemično (ICK) reakcijo s pomočjo primarnih protiteles določimo antigene (Ag) v vzorcih, odvzetih z aspiracijsko biopsijo s tanko iglo (ABTI), v izlivih, tkivnih vzorcih dezintegriranih bezgavk in drugih citoloških vzorcih. Za dodatna ICK barvanja vzorce lahko pripravimo s citocentrifugo (citospini) ali z enim od aparatov za pripravo tekočinskih citoloških vzorcev. Vzorce, ki jih pripravljamo z aparatom za pripravo tekočinskih citoloških vzorcev, pred pripravo fiksiramo v posebnem transportnem mediju. Z nalogo smo želeli primerjati učinkovitost ICK barvanja citospinov in preparatov, pripravljenih iz citoloških vzorcev, shranjenih v različnih transportnih medijih. Za pripravo slednjih smo uporabili aparat BD Totalys SlidePrep, testirali pa smo 3 transportne medije (CytoRich Red, CytoRich Blue in SurePath). V prvem delu naloge smo na celični liniji MCF-7 testirali rezultate ICK barvanj dveh označevalcev; estrogenski receptor (ER) in CK AE1/AE. Na podlagi rezultatov smo se za nadaljevanje naloge odločili za transportni medij CytoRich Red. V drugem delu naloge smo na 10 citoloških vzorcih z ICK metodo določili izraženost 8 označevalcev (ER, CK AE1/AE3, kalretinin, MOC-31, LCA (CD45), TTF-1, MM koktejl, p40). Rezultate ICK barvanj smo ocenili štirje ocenjevalci. Ocenjevali smo reakcijo, intenziteto barvanja, morfologijo celic, kontrastiranje in ozadje. Primerjali smo ohranjenost morfologije in rezultate ICK reakcij na citospinih (C), in na z BD Totalys SlidePrep pripravljenih preparatih (BD). Statistično značilne razlike v ICK reakcijah med C in BD v večini primerov nismo dokazali, zato sklepamo, da so vsi postopki primerni za rutinsko ICK dokazovanje Ag.20212021-09-11 07:15:29Magistrsko delo/naloga130177sl