Izražanje mRNA himernih antigenskih receptorjev v limfocitih TPlesnik, Klavdija (Avtor) Rajčević, Uroš (Mentor) Limfociti Thimerni antigenski receptorelektroporacijamRNA.Biomedicinska uporabnost gensko spremenjenih imunskih celic (predvsem limfocitov T) izkazuje veliko vrednost za zdravljenje malignih bolezni. V limfocitih T se izražajo različni molekulski konstrukti za terapevtske učinkovine, ki lahko vplivajo na potek bolezni. Za vstavljanje mRNA molekulskih konstruktov himernih antigenskih receptorjev (CAR T), ki smo jih v celice celičnih linij Jurkat želeli vstaviti v nalogi, smo uporabili elektroporacijo. Z optimizacijo postopkov smo opredelili uporabne pogoje za vstavljanje le-teh v človeške limfocite T. Limfocite T bi odvzeli pacientu, spremenili v laboratoriju in jih namnožili ter nato vrnili v periferno kri pacienta, kjer bi se izrazil protein konstrukta in opravil svojo nalogo. mRNA molekulskega konstrukta α-CAR-CD19 se je pri 1000 V ali 1100 V, dolžini pulza 40 ms izražala v 22 in 40,2 % celic celične linije Jurkat. S pravilno predpripravo in uspešno prepisanim molekulskim konstruktom v mRNA v procesu transkripcije in vitro, smo lahko zelo uspešni pri elektroporaciji vektorjev v celice pod danimi pogoji. Najpomembnejši postopek pri sami predpripravi pa je pravilna modifikacija mRNA.20212021-03-18 07:15:12Magistrsko delo/naloga125470sl