Povezanost polimorfizmov v genih za glutation peroksidazo in glutation disulfid reduktazo s koncentracijo 8-hidroksi-deoksigvanozina v urinuVukoja, Jure (Avtor) Marc, Janja (Mentor) Prodan Žitnik, Irena (Komentor) 8-hidroksi-deoksi gvanozinglutationglutation-peroksidazaglutation-reduktazaoksidativni stresEndogeni 8-hidroksi-deoksi gvanozin (8-OHdG) nastaja kot posledica reakcije hidroksilnega radikala z deoksigvanozinskimi ostanki, njegova prisotnost pa lahko povzroči transverzijske mutacije GC>TA, ki vodijo v polimorfizme ter hitrejše krajšanje telomer. Uporablja se tako kot diagnostični kot prognostični kazalnik stanj, ki so posledica oksidativnega stresa v telesu. Izloča se z urinom, kar omogoča neinvaziven odvzem in merjenje koncentracije pri posamezniku. Glutation-peroksidaze so družina encimov, ki organizem ščitijo pred oksidativnimi poškodbami preko redukcije vodikovega peroksida. Po drugi strani pa encimi glutation-reduktaze, čigar vloga je redukcija oksidirane oblike glutationa – GSSG nazaj v sulfhidrilno obliko – GSH, na ta način posredno delujejo kot obrambni element proti oksidativnemu stresu. Namen magistrskega dela je bil primerjati metodi RFLP in PCR v realnem času ter ugotoviti morebitno povezanost polimorfizmov rs1050450 G<A v genu za glutation-peroksidazo (GPx) in rs2978663 A<G v genu za glutation disulfid-reduktazo (GSR) s koncentracijo 8-hidroksi-deoksi gvanozina v urinu. V ta namen smo z metodo PCR v realnem času s specifičnimi TaqMan sondami določili genotip obeh polimorfizmov rs1050450 G<A in rs2978663 A<G pri 175 nosečnicah z območja Slovenije in Hrvaške, starih med 19 in 44 let, ki so sodelovale v projektu PHIME in za katere smo imeli podatke o urinski koncentraciji 8-hidroksi-deoksi gvanozina. S primerjavo metod RFLP in PCR v realnem času za polimorfizem rs2978663 A<G v genu za GSR smo ugotovili, da dajeta enake rezultate, vendar je izbira metode PCR v realnem času bolj smiselna, saj je hitrejša, cenovno ugodnejša, obenem pa z manj koraki dovoljuje manj možnosti za napake. Za polimorfizma rs1050450 G<A in rs2978663 A<G s pomočjo statistične analize nismo dokazali vpliva genotipa na koncentracijo 8-OHdG v urinu kot kazalcem oksidativnega stresa. Zaključimo lahko da predstavlja nivo 8-OHdG neodvisen kazalec oksidativnega stresa, ki ni povezan s prisotnostjo/odsotnostjo genetskih sprememb rs1050450 in rs2978663 v genih za glutation-peroskidazo in glutation-reduktazo.20212021-01-21 08:45:02Magistrsko delo/naloga124430sl