Izboljšava CAR-T celične imunoterapije z implementacijo verige CD3εKostevc, Tomislav (Avtor) Jerala, Roman (Mentor) Gunčar, Gregor (Komentor) CAR-Timunoterapija rakacelična terapijaCD3eImunoterapija raka je skupina sodobnih terapevtskih pristopov za tarčno zdravljenje malignih obolenj. Zelo uspešna imunoterapevtska strategija je zdravljenje s celicami CAR-T. Zdravljenje poteka z avtolognimi limfociti T, v katere se vstavi genski zapis za receptor CAR, celice pa se nato znova injicira v pacienta. Celice CAR-T prepoznajo tumorski antigen, kar povzroči T-celično aktivacijo in uničenje rakavih celic. CAR-T celične terapije so odobrene za klinično rabo, vendar so uspehi zaenkrat omejeni le na nekatere vrste krvnih rakov. V okviru magistrskega dela smo razvili nov dizajn receptorjev CAR, ki temeljijo na uporabi verige CD3ε, s čimer smo želeli doseči kooperativnost med CAR in nativnim TCR. Pripravili smo pet različnih genskih konstruktov CAR in potrdili njihovo izražanje na površini limfocitov T. Novi receptorji CAR so ob stimulaciji s tarčnim antigenom sprožili T-celično aktivacijo. Interakcija med receptorjem CAR in nativnim TCR je bila bolj izrazita pri inovativnih receptorjih CAR kot pri konvencionalnih CAR. Za preučevanje mehanizma interakcije med CAR in TCR smo z uporabo metode CRISPR-Cas9 začeli razvijati celično linijo z izbitim genom za CD3ε. Dizajn receptorjev CAR na osnovi verige CD3ε bo služil za nadaljnji razvoj in optimizacijo CAR-T celične terapije.20202020-12-07 16:05:00Magistrsko delo/naloga122382sl