Vpliv polžje sline na rast in tvorbo biofilma pri bakterijah Staphylococcus aureus in Pseudomonas aeruginosaŽlender, Tanja (Avtor) Starčič Erjavec, Marjanca (Mentor) Tkalec, Valerija (Komentor) bakterijski biofilmitvorba biofilmaStaphylococcus aureusPseudomonas aeruginosavrtni polžHelix aspersa Müllerpolžja slinaprotimikrobne snovinaravne učinkovinePolžji slini pripisujejo protimikrobno in protivnetno delovanje ter vzpodbujanje celične regeneracije. Namen magistrske naloge je bil raziskati učinek polžje sline hrapavega vrtnega polža (Helix aspersa Müller) na rast celic in tvorbo biofilma pri bakterijah Staphylococcus aureus in Pseudomonas aeruginosa v optimiziranem sistemu za določanje biofilma. Bakteriji S. aureus in P. aeruginosa sta pogosto izolirani iz kroničnih ran. Gre za oportunistična patogena, ki pri ljudeh povzročata širok spekter lokalnih in sistemskih okužb. Njuno zdravljenje zaradi pojavljanja odpornosti proti številnim uveljavljenim protimikrobnim zdravilom postaja vse večji izziv. Zato so raziskave novih pristopov za obvladovanje okužb zelo aktualne. V nalogi smo najprej optimizirali sisteme za testiranje vpliva polžje sline na rast celic in tvorbo biofilma. V sklopu tega smo testirali dve obliki polistirenskih mikrotitrskih ploščic (z ravnim in ukrivljenim dnom), gojišča LB, BHI in TSB brez dodane glukoze in z dvema različnima koncentracijama glukoze (0,2 in 2 %), določili protokol za pripravo testnih bakterijskih kultur (gojenje bakterijske kulture s stresanjem in brez ter čas inkubacije bakterijske kulture pred testiranjem polžje sline) ter optimizirali protokol za merjenje biofilma. Izmed sedmih sevov bakterije S. aureus in šestih sevov bakterije P. aeruginosa, pridobljenih iz kroničnih ran, smo izbrali po dva najboljša tvorca biofilma, ki smo ju uporabili v poskusih s polžjo slino. Za testiranje vpliva polžje sline na rast celic in tvorbo biofilma smo izbrali optimalne parametre sistema: mikrotitrsko ploščico z ukrivljenim dnom, gojišče BHI brez dodane glukoze za bakterijo P. aeruginsa in gojišče BHI z 2 % glukozo za bakterijo S. aureus ter 10-urno bakterijsko kulturo v eksponentni fazi rasti. Ugotovili smo, da filtrat naravne polžje sline ne zavira rasti celic in tvorbe biofilma oz. ju v nekaterih primerih, sploh pri bakteriji P. aeruginosa, lahko tudi vzpodbuja.[T. Žlender]20202020-10-31 07:15:04Magistrsko delo/naloga121808sl