Izolacija in karakterizacija bakterij z antimikrobnim učinkom proti bakteriji Aggregatibacter actinomycetencomitansNovak, Nastja (Avtor) Kocbek, Petra (Mentor) Lapanje, Aleš (Komentor) Aggregatibacter actinomycetencomitans ustna votlina gojitvene metode protimikrobne snovi BacillusUstna votlina predstavlja habitat številnim vrstam mikroorganizmov, ki v določenih pogojih lahko povzročijo različne bolezni, kot je parodontalna bolezen. Ker trenutne smernice zdravljenja ne vodijo do želenih rezultatov, so aktualni novi pristopi zdravljenja, med katere spada tudi lokalno zdravljenje s probiotiki. To zdravljenje temelji na inhibiciji rasti parodontalno patogenih bakterij in zaradi razrasti probiotičnih bakterij ter nastanka probiotičnega biofilma onemogoči ponovno kolonizacijo patogenih mikrobov. Namen magistrske naloge je bil pridobiti avtohtone bakterijske seve s protimikrobnim učinkom proti parodontalno patogeni bakteriji Aggregatibacter actinomycetemcomitans iz ustne votline posameznikov z majhnim številom zalivk na zobeh. Za pridobitev bakterijskih sevov s protimikrobnim učinkom smo razvili protokol vzorčenja ustne votline. Ovrednotili smo vpliv vnosa hrane na pojavnost sevov s protimikrobnim učinkom, zato smo vzorčenje izvedli v različnih časovnih točkah (jutranje, popoldansko vzorčenje in t.i. vzorčenje z minimalnim vplivom hrane). Preverili smo tudi ali so sevi s protimikrobnim učinkom prisotni v vseh ekoloških biotopih, zato smo vzorčili štiri različna mesta v ustni votlini (slino, bukalno sluznico, jezik in površino zob). Uporabili smo obogatitvena gojišča za izolacijo aktinomicet in po Gramu pozitivnih bakterij. V naslednjem koraku smo razvili metodo za vrednotenje protimikrobnega učinka izoliranih bakterij na bakteriji Escherichia coli in Aggregatibacter actinomycetemcomitans. Ugotovili smo, da izolirani bakterijski sevi iz ustne votline kažejo protimikrobni učinek na A. actinomycetemcomitans iz vseh mest ustne votline in iz vseh časovnih točk. S tem smo pokazali, da prispeva k zdravi ustni flori tako hipoteza o ekološki niši kot hipoteza emigracije in imigracije. V zaključni fazi raziskave smo izolirane bakterije s protimikrobnim učinkom karakterizirali z molekularnimi mikrobiološkimi metodami. Večina sevov s protimikrobnim učinkom izoliranih iz ustne votline, ki delujejo proti A. actinomycetemcomitans spada v rod Bacillus. Na podlagi pridobljenih rezultatov lahko predlagamo bakterije rodu Bacillus kot probiotični način zdravljenja parodontalne bolezni. Naša študija je prvi primer, kjer smo iz ustne votline izolirali bakterije rodu Bacillus s protimikrobnim učinkom na parodontalno patogeno bakterijo A. actinomycetemcomitans.[N. Novak]20172020-09-21 09:54:31Magistrsko delo/naloga120511sl