Primerjava virusne filtracije monoklonskih protiteles v laboratorijskem in proizvodnem obseguŠkrinjar, Patrick (Avtor) Narat, Mojca (Mentor) Vašl, Jožica (Komentor) Monoklonska protitelesazaključni procesikromatografijafiltracija virusovlaboratorijsko meriloproizvodno meriloMonoklonska protitelesa predstavljajo v farmacevtski industriji znaten delež bioloških zdravil. Protitelesa ali imunoglobulini (Ig) so kompleksne molekule, velike približno 150 kDa, katerih pridobivanje poteka s pomočjo sesalskih celic v za to namenjenih bioreaktorjih. Ker se lahko med procesom proizvodnje produkt okuži z virusi, je v zaključnih procesih potrebno zagotoviti njihovo odstranitev. Tako se virusi odstranijo s kromatografskimi tehnikami ter postopki inaktivacije virusov in filtracije virusov. Slednjo lahko izvedemo na 2 načina, kot direktno (DFF) ali kot tangencialno filtracijo (TFF). V našem primeru je bila izvedena direktna filtracija, s čimer smo želeli primerjati koraka filtracije virusov v proizvodnem in laboratorijskem merilu. Poskus v laboratoriju je bil izveden pri enakih pogojih kot v proizvodnem merilu, uporabljeni so bili filtri enakega tipa in proizvajalca. Za poskus smo uporabili tlačno posodo in jo z digitalnim manometrom uravnavali pri stalnem tlaku. Filtrat smo zbirali v čaši, njegovo masa pa spremljali s tehtnico. Vzorcem smo pomerili pH, prevodnost, koncentracijo, vsebnost agregiranih mAb, vsebnost kislih in bazičnih različic mAb, odstotek čistosti, vsebnost ostalih različic mAb in izračunali izkoristke filtracij. Podatke smo primerjali s t-testom in primerjali povprečja rezultatov laboratorijskega merila z 3SD intervali rezultatov proizvodnega merila. Dokazali smo, da je proces filtracije virusov v laboratorijskem merilu primerljiv s procesom v proizvodnem merilu za parametre pH, prevodnost, vsebnost agregatov, odstotek čistosti, vsebnost kislih in bazičnih različic mAb in vsebnost različic mAb 2. Pri parametrih koncentracija, donos, vsebnost različic mAb 1 in različic mAb 3 smo ugotovili statistično signifikantno razliko med podatki pridobljenimi v laboratorijskem in proizvodnem merilu.[P. Škrinjar]20202020-09-16 07:17:05Magistrsko delo/naloga120099sl