Imobilizacija encimov v nanostrukturah integriranih v mikroreaktorjeErklavec Zajec, Vivian (Avtor) Žnidaršič Plazl, Polona (Mentor) mikroreaktorimobilizacijananostrukturetransaminazaesterazaMikroreaktorji, ki so po definiciji reaktorji z vsaj eno dimenzijo pod 1mm, so vedno bolj zanimivi industriji in vedno bolj uveljavljajo svojo pomembnost v biokatalitskih procesih. Njihove lastnosti, kot so dobro razmerje med površino in volumnom, lahka kontrola nad procesom, majhna poraba reagentov, omogočajo mikroreaktorjem učinkovite procese. Za dodatno povečanje razmerja med površino in volumnom v mikroreaktorjih, je v porastu integracija nanostruktur kot so nanovzmeti in nanotkanine, v mikroreaktorje. Omenjene nanostrukture so se v preteklosti izkazale kot izjemen nosilec za imobilizacijo encimov z označevalci. V okviru magistrskega dela sem razvila mikroreaktor v katerem sem želela izvajati imobilizacijo encimov in izvedbo biotransformacije. Opravila sem karakterizacijo nanovzmeti za določevanje hidrofobnosti. S ploščicami, ki so vsebovale različno gosto porazdeljene nanovzmeti, sem ugotovila, da z višjo gostoto porazdelitve nanovzmeti narašča tudi začetna hidrofobnost. V okviru karakterizacije sem opravila analizo z vrstičnim elektronskim mikroskopom (SEM). Ugotovila sem, da je površina nanovzmeti zgoščena in zlepljena. Predvidevam, da je to zaradi izpostavitve visoki temperaturi med njihovo pripravo. To je tudi lahko razlog za slabo učinkovitost nanovzmeti. ω-transaminazo z Zbasic2 označevalcem (N-SBM-ATA-wt) sem imobilizirala na silicijeve nanovzmeti preko ionskih interakcij med peptidnim označevalcem in nabito površino. Imobilizacija N-SBM-ATA-wt ni bila učinkovita, kar lahko pripišem zlepljenosti in zgoščenosti nanovzmeti in njihovi neustrezni hidrofilnosti. Karboksilno esterazo pridobljeno iz Archaeoglobus fulgidus (AF-Est2) s polihistidinskim označevalcem sem imobilizirala na nanotkanino z bakrovimi ioni na osnovi afinitetne imobilizacije med označevalcem in površino Ugotovila sem, da je bila imobilizacija AFEst2 na nanotkanine učinkovita, saj se je imobiliziralo tudi 100% encima, prav tako pa je bila uspešna tudi regeneracija nanotkanine z vnosom bakrovih ionov.20202020-06-01 14:10:05Magistrsko delo/naloga116663sl