Primerjava testov za testiranje celičnih linij na prisotnost mikoplazemPoljanšek, Tadeja (Avtor) Oven, Irena (Mentor) mikoplazmeMollicutescelične linijecelične kultureokužbatestiranje okuženostiMycoplasma hyorhinisPCRHoechst 33342sekvenciranjezdravljenjeokužene linijeMikoplazme so najmanjši in najpreprostejši prokarionti, ki pogosto okužijo celične kulture v laboratoriju in vplivajo na fiziologijo in metabolizem evkariontskih celic. Z različnimi testi, ki so vključevali PCR, barvanje DNA in komercialne teste, smo preverili prisotnost mikoplazem v celičnih kulturah v našem laboratoriju. Izkazalo se je, da je kar nekaj najpogosteje uporabljenih celičnih linij okuženih z mikoplazmami. Ker nas je zanimalo, s katero vrsto mikoplazem so okužene, smo pomnoženo zaporedje ribosomalne DNA mikoplazem sekvencirali in primerjali s sekvencami že znanih mikoplazem. Ugotovili smo, da so preverjene celične kulture okužene z Mycoplasma hyorhinis. Mikoplazme smo iz okuženih kultur poskusili odstraniti z dodatkom antibiotika gentamicina, ki smo ga dodali v visoki koncentraciji direktno v celično gojišče, vendar so celice ostale okužene, saj je M. hyorhinis nanj verjetno odporna. Za najbolj uporabno metodo detekcije mikoplazem v celičnih kulturah se je izkazala verižna reakcija s polimerazo, saj je bila najbolj zanesljiva in cenovno primerna, hkrati pa preprosta in primerna za analizo več vzorcev naenkrat.[T. Poljanšek]20202020-02-19 07:45:59Magistrsko delo/naloga114137sl