Vpliv hladne atmosferske tlačne plazme na tvorbo stresnih granul v izbrani stabilni celični linijiČerček, Urša (Avtor) Bratkovič, Tomaž (Mentor) Rogelj, Boris (Komentor) hladna atmosferska plazma (CAP)stresne granuleeIF2αISRIBcelični stresHladna atmosfersko tlačna plazma (plazma) je ioniziran plin, ki je zelo učinkovit pri različnih medicinskih aplikacijah. Najbolj obetavni rezultati so na področju zdravljenja raka in celjenja ran. Kljub znanim učinkom plazme v medicini in mehanizmom, ki spremljajo delo-vanje v daljšem časovnem obdobju, so kratkoročni učinki na sesalske celice slabo raziskani. Plazma dokazano sproži tvorbo reaktivnih kisikovih in dušikovih spojin, ki so običajno odgovorne za sprožitev oksidativnega celičnega stresa. Prvi odziv celic na prehod iz normalnih v stresne pogoje je tvorba stresnih granul. Z njihovo pomočjo celica varčuje z energijo in ohrani le tiste procese, ki ji omogočajo preživetje. Stresne granule so prehodni citoplazemski organeli brez membrane, ki po ustavitvi sinteze proteinov združujejo neprevedene sporočevalne ribonukleinske kisline, proteine, translacijske dejavnike in druge komponente. Po prenehanju stresa se stresne granule razgradijo in komponente so na voljo za ponovno translacijo oziroma jih celica odstrani v procesu avtofagije. S pomočjo stabilne celične linije FlpIn SH-SY5Y, ki ima vstavljen zapis za fuzijski protein G3BP1, označen z rdečim fluorescenčnim proteinom mScarletI, smo opazovali nastanek in dinamiko stresnih granul po dodatku plazme. Pokazali smo, da plazma sproži nastanek stresnih granul, ki je odvisen od pretoka in časa izpostavitve ter je po dinamiki podoben odzivu celic na oksidativni stres. Pri tem smo uporabili plazemsko šobo z argonom. Nastanek stresnih granul poteka preko poti, odvisne od evkariontskega iniciacijskega dejavnika 2α (eIF2α), kar smo dokazali z uporabo selektivnega zaviralca ISRIB. Po uporabi zaviralca se je odstotek celic s stresnimi granulami zmanjšal za skoraj sedemkrat glede na kontrolo. To so prvi rezultati, ki kažejo takojšen odziv sesalskih celic na prisotnost plazme in lahko pripomorejo k izboljšanim terapijam pri medicinskih aplikacijah in razumevanju možnih stranskih učinkov.20202020-02-14 08:35:07Magistrsko delo/naloga114094sl