Spreminjanje produktivnosti pridobivanja bakteriofagov v kontinuirnem sistemuKuzmić, Nina (Avtor) Podgornik, Aleš (Mentor) bakteriofag T4E.coli K-12kontinuirna proizvodnjaproduktivnosthitrost redčenjaBakteriofagi so prisotni povsod okrog nas. Njihova ključna vloga je regulacija mikrobnega ravnovesja v različnih ekosistemih, prav tako pa se zaradi različnih prednosti, antibakterijskih učinkov ter naraščanja antibiotske rezistence vse bolj uporabljajo pri zdravljenju bakterijskih okužb ter v najrazličnejših medicinskih in okoljskih aplikacijah. Bakteriofagi za svoj obstoj potrebujejo bakterije in so njihovi naravni sovražniki. Sodelujejo v procesu infekcije in končne lize bakterije. Gojenje bakteriofagov v laboratorijskem merilu se običajno izvaja v stresalnih kulturah, medtem ko se v industriji uporabljajo šaržni procesi v bioreaktorjih. Pri zdravljenju z bakteriofagi so potrebne večje količine bakteriofagov, zato smo se med raziskovanjem ukvarjali z vplivom spreminjanja hitrosti redčenja na produktivnost gojenja bakteriofagov v kontinuirnem sistemu. V kontinuirnih sistemih nenehno dovajamo hranila in odvajamo odpadne produkte in celice, zato je volumen v bioreaktorju ves čas konstanten in se v določenem času vzpostavi stacionarno stanje. To smo spremljali z merjenjem optične gostote. Miniaturni kontinuirni sistem je sestavljen iz črpalke in dveh zaporedno povezanih bioreaktorjev »C« in »P« (volumen prvega je 25 ml, volumen drugega je 5 ml). Svež napajalni tok je tekoče LB gojišče, ki ga uvajamo v prvi bioreaktor »C«, kjer poteka gojenje bakterije. V drugem bioreaktorju »P« poteka pomnoževanje bakteriofagov. Kot modelna organizma smo uporabljali bakterijo E. coli K-12 in bakteriofag T4. Izvajali smo dva različna tipa eksperimentov z variabilnim in konstantnim fiziološkim stanjem bakterije. Iztok iz drugega reaktorja in s tem število namnoženih bakteriofagov smo spremljali z vzorčenjem. Vzorce smo nato analizirali in ovrednotili s CFU in PFU analizo. Iz podatkov o koncentraciji bakteriofagov in hitrosti redčenja v drugem bioreaktorju smo izračunali in spreminjali produktivnost. Pokazali smo, da pri optimalni hitrosti redčenja dosežemo maksimalno koncentracijo fagov in produktivnost.20192020-01-15 13:03:39Magistrsko delo/naloga113516sl