Produkcija, izolacija in karakterizacija poli-y-glutaminske kisline z mutanto bakterije Bacillus subtilis PS216.Šendlinger Krajnc, Tilen (Avtor) Dogša, Iztok (Mentor) Bacillus subtilisγ-PGAreologijaviskoznostviskoelastičnostV produkcijskem gojišču poli-γ-glutaminske kisline (γ-PGA), ki ne vsebuje glutamata, je bila mutanta Bacillus subtilis PS-216 srf-cfp pri šaržnem načinu gojenja s koncentracijo (4,1 ± 0,5) g/L γ-PGA najboljši producent med vsemi testiranimi »od glutaminske kisline neodvisnimi« sevi. Z rotacijskim reološkim testom smo pokazali, da je bila tudi viskoznost rabljenega produkcijskega gojišča γ-PGA najvišja pri mutanti Bacillus subtilis PS-216 srf-cfp. Najbolj, 2-krat, se je v časovnem optimumu produkcije, povečala viskoznost produkcijskega gojišča, ki smo mu dodali glutamat v primerjavi z viskoznostjo produkcijskega gojišča brez glutamata. Z združitvijo rezultatov izbranih sevov smo pokazali, da koncentracija γ-PGA v produkcijskem gojišču močno pozitivno korelira z njegovo viskoznostjo izmerjeno pri visokih strižnih hitrostih. Z meritvami viskoznosti rabljenega gojišča lahko torej hitro napovemo koncentracijo γ-PGA v produkcijskem gojišču. Pokazali smo, da kljub relativno veliki biomasi (⡈ 2 x 109 celic/mL) k viskoznosti rabljenega gojišča večinsko prispeva γ-PGA, celice pa lahko pomembno povišajo viskoznost gojišča pri nizkih strižnih hitrostih, ko so vpete v mrežo prepletenih molekul γ-PGA. Skladno s tem smo z amplitudnim oscilacijskim testom pokazali, da ima rabljeno gojišče lastnosti viskoelastične trdnine, gela. Ko smo odstranili celice, se je rabljeno gojišče obnašalo kot viskoelastična tekočina. S frekvenčnim testom smo pokazali, da z višanjem frekvence rabljeno gojišče najhitreje pridobiva lastnosti viskoelastične trdnine, medtem ko v območju testiranih frekvenc ločena γ-PGA ali celice ohranjajo lastnosti viskoelatične tekočine, kar kaže na vpetost celic v mrežo γ-PGA.[T. Šendlinger Krajnc]20202020-01-02 07:45:35Magistrsko delo/naloga113418sl