<?xml version="1.0"?>
<rdf:RDF xmlns:rdf="http://www.w3.org/1999/02/22-rdf-syntax-ns#" xmlns:dc="http://purl.org/dc/elements/1.1/"><rdf:Description rdf:about="https://repozitorij.uni-lj.si/IzpisGradiva.php?id=110589"><dc:title>Vzpostavitev enostavnega sistema za  inducibilno izražanje genov v tobaku in krompirju</dc:title><dc:creator>Pogačar,	Karmen	(Avtor)
	</dc:creator><dc:creator>Gruden,	Kristina	(Mentor)
	</dc:creator><dc:creator>Coll Rius,	Anna	(Komentor)
	</dc:creator><dc:subject>biotehnologija</dc:subject><dc:subject>glukokortikoidni inducibilni sistem</dc:subject><dc:subject>TGA2.1</dc:subject><dc:subject>RbohD</dc:subject><dc:subject>deksametazon</dc:subject><dc:subject>krompir</dc:subject><dc:subject>Solanum tuberosum</dc:subject><dc:subject>Nicotiana benthamiana</dc:subject><dc:subject>konfokalna mikroskopija</dc:subject><dc:subject>qPCR</dc:subject><dc:subject>PVY</dc:subject><dc:description>Pri genski modifikaciji rastlin se najpogosteje uporablja konstitutivno izražanje genskih konstruktov. Konstitutivno izražanje genskih konstruktov pogosto omejuje rast rastline. Pri uporabi inducibilnega izražanja se lahko izognemo tem omejitvam, saj s pomočjo inducibilnega sredstva sprožimo prepis želenega gena ob točno določenem času. V magistrskem delu smo uporabili glukokortikoidni inducibilni sistem, ki ga inducira deksametazon. Za preverjanje delovanja sistema smo rastline Nicotiana benthamiana transformirali s plazmidom, v katerega smo vstavili gen za rumeni fluorescentni protein (YFP), čigar izražanje je pod vplivom glukokortikoidnega inducibilnega promotorja. S konfokalno mikroskopijo smo v določenih časovnih točkah spremljali fluorescenco YFP v povrhnjici polovice lista in zaznali signal 24 ur po indukciji. Drugo polovico lista smo uporabili za preverjanje izražanja gena YFP z verižno reakcijo s polimerazo v realnem času (qPCR) in zaznali signal 2 uri po indukciji. Pri kontrolni rastlini signala nismo zaznali. V naslednjem koraku smo se osredotočili na dva obrambna gena krompirja, RbohD in TGA2.1. Iz DNK krompirja sorte Rywal smo pridobili nukleotidno zaporedje dveh različic gena RbohD, in sicer RbohD1 in RbohD2. Nato smo vzpostavljeni inducibilni sistem uporabili pri stabilni transformaciji krompirja sorte NahG-Rywal za izražanje gena TGA2.1. S qPCR smo izbrali dve transgeni liniji, pri katerih je bilo po tretiranju izražanje gena TGA2.1 povečano. Uporabili smo ju za nadaljnje preučevanje funkcije gena TGA2.1 z okuževanjem rastline s krompirjevim virusom Y (PVY) in ugotovili, da povečano izražanje gena TGA2.1 pripomore k obrambi pred virusom.</dc:description><dc:publisher>[K. Pogačar]</dc:publisher><dc:date>2019</dc:date><dc:date>2019-09-18 07:45:23</dc:date><dc:type>Magistrsko delo/naloga</dc:type><dc:identifier>110589</dc:identifier><dc:language>sl</dc:language></rdf:Description></rdf:RDF>