Zaznavanje majhnih molekul z uporabo ločenih verig protitelesKolenc, Živa (Avtor) Jerala, Roman (Mentor) Lebar, Tina (Komentor) Sintezna biologijakemijsko inducirana dimerizacijacepljena protitelesascFvSintezna biologija stremi k pripravi novih molekularnih metod za preučevanje in uravnavanje procesov v celicah sesalcev. Diplomska naloga predstavlja nov, z majhnimi molekulami nadzorovan dimerizacijski sistem na osnovi ločenih enoverižnih fragmentov protiteles. Za dokaz koncepta smo si izbrali enoverižni variabilni fragment protitelesa proti estradiolu v fuziji s kresničkino luciferazo, ki je delovala kot poročevalski sistem. Z dodatkom estradiola v gojišče smo v celicah sesalcev uspešno sprožili dimerizacijo ločeno izražene lahke in težke verige protitelesa. Z MTT testom smo dokazali, da sistem deluje tudi pri koncentraciji estradiola, ki za celice ni toksična. S takšnim sistemom bi lahko na preprost način nadzorovali celične procese, kot so transkripcija, lokalizacija proteinov ali celična signalizacija. V delu smo predstavili le eno izmed protiteles in ligandov, sistem pa bi z uporabo drugih protiteles in ligandov lahko postal univerzalen.[Ž. Kolenc]20192019-09-18 07:45:03Diplomsko delo/naloga110585sl