Analiza velikosti genoma v populaciji proteusa s slikovno citometrijoKolar, Darja (Avtor) Bizjak Mali, Lilijana (Mentor) Kladnik, Aleš (Komentor) biologijaProteus anguinusevropska jamska repata dvoživkaendemit Dinarskega krasavelikost genomavrednost Cslikovna citometrijaNamen raziskave je bil ugotoviti, ali so krvne celice proteusov (Proteus anguinus) iz arhivske zbirke primeren material za oceno velikosti jedrnega genoma s pomočjo slikovne citometrije. Krvne celice smo vzorčili iz ventrikla srca arhiviranih živali in barvali po Feulgenu s Schiffovim reagentom, ki specifično barva DNA. Meritve integrirane optične gostote (IOG) so bile izvedene na jedrih rdečih krvničk. Kot standard smo uporabili krvne celice arhiviranih osebkov nektura (Necturus maculosus), kot kontrolo pa krvne razmaze, pripravljene iz sveže krvi. Izračunane vrednosti C so bile zelo variabilne in so večinoma močno odstopale od znane ocenjene velikosti genoma proteusa v bazi Animal Genome Size Database. Krvne celice, izolirane iz srca živali iz arhivske zbirke, so bile neuporabne za meritve IOG in izračun vrednosti C, saj so bile živali večinoma neprimerno fiksirane in arhivirane. Vrednosti C primerljive objavljenim podatkom, smo dobili na vzorcih svežih krvnih razmazov in izoliranih krvnih celicah osebkov, fiksiranih bodisi v etanolu bodisi v formaldehidu, ki so bili nato arhivirani v etanolu. Za nadaljnje raziskave velikosti genoma s slikovno citometrijo so najbolj primerni sveži krvni razmazi, slednje velja tudi za nektura kot standard.20192019-09-12 07:45:03Magistrsko delo/naloga110088sl