Lipidi in cirkadiana ura: izsledki na humanih celičnih linijah U2OS in Huh7Malovrh, Katja (Avtor) Rozman, Damjana (Mentor) cirkadiana uraizražanje genovlipidi in holesteroltransfekcijametabolična aktivnostŽivljenje na zemlji je prilagojeno rotacijam našega planeta in njegovim 24-urnim ciklom izmenjevanja dneva in noči. To pomeni, da 24-urni cikel, ki je potreben, da se zemlja zavrti okoli svoje osi, določa delovanje in vedenje vseh organizmov na planetu. Prilagajanje ritmu zemlje živemu svetu omogoča notranja biološka ura, ki jo imenujemo cirkadiana ura. Gre za biokemijski oscilator, ki deluje v približno 24 ur trajajočih ciklih in je vezan na solarni čas. Človeško telo je kompleksen sistem, v katerem imajo različni organi natančno določene vloge, zato njihove celice izražajo različne gene, ki odgovarjajo na potrebe organizma. Izražanje perifernih cirkadianih genov vodi glavna ura, ta pa ni edina, ki lahko vpliva na izražanje v različnih tkivih. Namen magistrske naloge je bil ugotoviti, kako prisotnost holesterola in lipoproteinov HDL in LDL vpliva na izražanje izbranih genov cirkadiane ure in na metabolizem v izbranih humanih celičnih linijah. Izražanje genov smo spremljali z metodo RT-qPCR, pa tudi s spremljanjem izražanja luminiscenčnega reporterja v stabilno transficiranih celicah z uporabo aparature LumiCycle. S testom AlamarBlue smo spremljali tudi, kako lipidi in holesterol vplivajo na metabolično aktivnost celic. Ugotovili smo, da HDL nima bistvenega vpliva niti na metabolizem, niti na izražanje genov cirkadiane ure. Na drugi strani sta LDL in holesterol povzročila večje spremembe. LDL sicer ni močno vplival na metabolizem, je pa zmanjšal izražanje vseh cirkadianih genov, ki smo jih izmerili. Enako smo pokazali tudi pri holesterolu, ki je hkrati tudi pospešil metabolizem celic. Ugotovili smo tudi, da se vplivi obremenitev z lipidi razlikujejo pri različnih celičnih linijah, kar nakazuje, da je cirkadiano izražanje genov tkivno specifično. Naši rezultati kažejo, da je lipidni metabolizem tesno povezan s cirkadiano uro. To pomeni, da sodobni življenjski slog, ki vpliva tako na lipidni metabolizem, kot tudi na cirkadiano uro, lahko predstavlja velik zdravstveni problem.20192019-09-09 11:55:12Magistrsko delo/naloga109864sl