Izražanje genov za sideroforje bakterije Escherichia coli na ravni posameznih celicTrajkova, Marija (Avtor) Žgur Bertok, Darja (Mentor) Escherichia colisideroforjijersiniabaktinenterobaktingenske fuzijeheterogeno izražanjerazdelitev metabolnega delaPostavili smo hipotezo, da se promotorja genov entC, za sintezo sideroforja enterobaktin in ybtA, za sintezo sideroforja, jersiniabaktin, izražata heterogeno oz., da manjši del bakterijske populacije izraža oba gena. V ta namen smo pripravili genski fuziji promotorja entC z genom gfp in promotorja ybtA z genom mCherry ter analizirali njuno izražanje. Genski fuziji entC-gfp in ybtA-mCherry smo konstruirali v vektorju pBAC, in ga s pomočjo transformacije vstavili v sev MG1655. Slednjega smo gojili v različnih pogojih, ter aktivnost promotorjev genov entC in ybtA analizirali s fluorescentno mikroskopijo. Pokazali smo, da se pri bakteriji Escherichia coli, sevu MG1655 obe fuziji ne izražata heterogeno, temveč homogeno v vseh celicah populacije. Aktivnost promotorja za sintezo entC smo zaznali pri celicah gojenih na minimalnem trdnem gojišču M9 z dodanim 0,25 mM 2,2-dipiridilom in glukozo, pH 7, pri 37 °C, medtem ko je bil promotor gena ybtA aktiven, v celicah, gojenih na minimalnem trdnem gojišču M9 z dodanim 0,25 mM 2,2-dipiridilom in glicerolom, pH 7, pri 30 °C. Z rastjo na hranilnem LB gojišču bakterija Escherichia coli pridobi dovolj železa, zato sinteza sideroforjev za privzem železa ni potrebna.M. Trajkova]20192019-09-08 07:46:10Magistrsko delo/naloga109784sl