Različne uporabe sistema CRISPR/Cas9, trenutne omejitve in obeti za prihodnostKostanjšek, Matic (Avtor) Oven, Irena (Mentor) biotehnologijaCRISPR/Cas9genski inženiringdCas9Sistem CRISPR/Cas9 je bakterijski način obrambe proti virusom. V zadnjih letih je postal najbolj uporabljena metoda za spreminjanje genomov. Sistem z enojno vodečo (sgRNA) specifično prepoznava točno določena zaporedja na genomu, kamor se nato veže protein Cas9 z nukleazno aktivnostjo. Zaradi enostavnosti spreminjanja zaporedja sgRNA in s tem tarče v genomu, ima sistem veliko aplikacij na številnih področij, od spreminjanja genoma rastlin za produkcijo terapevtskih proteinov, mikrobne biotehnologije, sintetične biologije, do direktnih kliničnih aplikacij pri ljudeh. Poleg dobro poznanih aplikacij sistema, s katerimi se genom spremeni, pa se je razvilo tudi ogromno drugih aplikacij. Sistem z deaktiviranim proteinom Cas9 se tako danes uporablja tudi za regulacijo prepisovanja genov ali spreminjanje epigenoma. Kljub širokemu spektru obstoječih aplikacij pa obstajajo omejitve, kot so netarčne mutacije ali težave z dostavo, ki zavirajo še širšo uporabo sistema. Pojavilo se je že veliko rešitev za te ovire. V zadnjem času je bilo izdelanih nekaj izboljšanih proteinov Cas9, prav tako pa je bilo razvitih več novih sistemov, s pomočjo katerih bi lahko težave omejili. Poleg tega je zelo pomembno predvideti in kasneje tudi validirati potencialne neželene učinke v obliki netarčnih mutacij.[M. Kostanjšek]20192019-06-02 07:45:51Diplomsko delo/naloga107893sl