Napovedni pomen označevalca rakavih matičnih celic NANOG pri seroznem adenokarcinomu jajčnikaKenda Šuster, Nataša (Avtor) Smrkolj, Špela (Mentor) Virant Klun, Irma (Komentor) NANOGrakave matične celiceserozni karcinom jajčnikovIzhodišče Patogeneza raka jajčnikov še vedno ni jasna. Novejše raziskave kažejo, da bi bile lahko za nastanek, razvoj in ponovitev tumorja po zdravljenju odgovorne rakave matične celice. Te tako kot embrionalne matične celice izražajo označevalce pluripotentnosti. NANOG je ključni transkripcijski dejavnik za uravnavanje samoobnavljanja in pluripotentnosti v embrionalnih matičnih celicah, izraža pa se tudi v različnih tumorjih, vključno z epitelijskim rakom jajčnikov. Namen naše raziskave je bil ovrednotiti izražanje označevalca NANOG pri bolnicah s seroznimi tumorji jajčnikov in pri seroznih karcinomih jajčnikov ter le-to primerjati s patohistološkimi in kliničnimi napovednimi kazalci. Preiskovanke in metode Prvi del raziskave je potekal retrospektivno, del prospektivno. V retrospektivnem delu raziskave smo izražanje označevalca NANOG določali z imunohistokemično metodo na tkivni mreži, zgrajeni iz arhiviranega tkiva jajčnikov. V raziskavo smo vključili 20 bolnic s seroznim benignim tumorjem jajčnikov, 30 bolnic s seroznim atipično proliferativnim (angl. borderline) tumorjem jajčnikov in 109 bolnic s seroznim karcinomom jajčnikov. Imunohistokemično reakcijo smo točkovali na osnovi intenzivnosti ter deleža obarvanega tumorja in na osnovi seštevka tumorje razdelili v štiri skupine: NANOG negativno (0), NANOG blago pozitivno (+1), NANOG zmerno pozitivno (+2) in NANOG močno pozitivno (+3) skupino. Za bolnice s karcinomom jajčnikov smo pridobili tudi klinične podatke in jih primerjali med omenjenimi skupinami. 20 tkivnih vzorcev seroznega karcinoma jajčnikov smo dodatno IHK barvali še na označevalca pluripotentnosti SOX2 in SSEA-4 ter označevalec za mezenhimske celice vimentin. V prospektivnem delu raziskave smo izražanje označevalca NANOG določali v 17 intraoperativno pridobljenih vzorcih seroznega tumorja jajčnikov. Poleg imunohistokemične metode smo pri tem uporabili tudi metodo prenosa western. Za analizo primerjave rezultatov obeh metod smo izračunali korelacijski koeficient. Rezultati V skupini arhiviranih vzorcev 159 seroznih tumorjev jajčnikov je bilo imunohistokemično NANOG pozitivnih 78 (49,1 %) tumorjev. Vsi NANOG pozitivni tumorji so bili patohistološko karcinomi visoke stopnje malignosti (p < 0,001). Vsi karcinomi nizke stopnje malignosti, vsi atipični proliferativni tumorji ter vsi benigni tumorji so bili NANOG negativni. Med karcinomi visoke stopnje malignosti je bilo NANOG pozitivnih 78 (73,6 %) tumorjev, od tega 24 (22,6 %) blago, 29 (27,4 %) zmerno in 25 (23,6 %) močno pozitivnih. Izražanje označevalca NANOG med seroznimi tumorji jajčnikov je bilo statistično značilno povezano z neugodnimi patohistološkimi napovednimi kazalci, to je stopnjo malignosti. Statistično značilne povezave s kliničnimi napovednimi kazalci, to je s starostjo bolnic, stadijem bolezni, ostankom tumorja po citoreduktivni operaciji, odzivom bolezni na kemoterapijo in preživetjem, pa nismo našli. Za neodvisna napovedna kazalca preživetja smo potrdili le stadij bolezni (p = 0,023) in ostanek tumorja po radikalni operaciji (p < 0,001). Rezultati prospektivnega dela raziskave so pokazali, da je imunohistokemično barvanja na NANOG pri bolnicah s seroznim tumorjem jajčnikov v statistično značilni korelaciji z rezultati metode prenosa western (p < 0,001). Dodatno smo s svetlobnim mikroskopom v povrhnjem epiteliju seroznega karcinoma jajčnikov zaznali spremembe, podobne epitelijsko-mezenhimski tranziciji, pri kateri se matičnim celicam podobne celice, pozitivne na označevalce pluripotentnosti, spreminjajo v rakavim matičnim celicam podobne celice, ki so poleg na označevalce pluripotentnosti pozitivne tudi na vimentin. Zaključek Imunohistokemična metoda je primerna diagnostična metoda določanja označevalca NANOG v tumorskih celicah bolnic s seroznimi tumorji jajčnikov. Imunohistokemično izražanje označevalca NANOG v tumorskih celicah pri bolnicah s seroznimi tumorji jajčnikov je bilo statistično značilno povezano s karcinomi visoke stopnje malignosti. Statistično značilne povezave med izražanjem označevalca NANOG in kliničnimi napovednimi kazalci nismo potrdili. S svetlobnim mikroskopom zaznane spremembe podobne epitelijsko-mezenhimski tranziciji, ter nastanek celic podobnih rakavim matičnim celicam, odpirajo novo področje za nadaljnje raziskave.20182018-10-31 07:45:04Doktorsko delo/naloga105154sl