Lokalizacija encima ACC-oksidaze v plodovih paradižnika (Solanum lycopersicum)Lavrič, Neja (Avtor) Strgulc Krajšek, Simona (Mentor) Kladnik, Aleš (Komentor) ACC-oksidazaEtilen je majhna plinska molekula, ki so jo raziskovalci odkrili v 19. stoletju in jo kasneje prepoznali kot prvi rastlinski hormon. Njena vloga je najbolj prepoznavna v biologiji rastlin, saj sodeluje v različnih procesih tekom celotnega življenjskega cikla rastline. Ti procesi vključujejo kalitev rastline, razvoj korenin in cvetov, zorenje plodov, senescenco, abscizijo in odgovore rastline tako na biotske (patogeni) kot na abiotske dejavnike (poškodba rastline, pomanjkanje kisika, mraz, poplave in suše). Sintetizira se iz prekurzorja 1-aminociklopropan-1-karboksilne kisline (ACC), njegovo pretvorbo pa katalizira encim ACC-oksidaza. ACC-oksidazo najdemo tako v vegetativnih, kakor v reproduktivnih tkivih rastline. Z raziskavo smo želeli ugotoviti, katera so specifična mesta, kjer se nahaja ACC-oksidaza v plodovih paradižnika. Encim smo lokalizirali z metodo imunolokalizacije z uporabo specifičnih primarnih protiteles proti ACC-oksidazi in raziskali, kako vpliva uporaba različnih pufrov v postopku povrnitve antigenov. Z imunolokalizacijo se obarvajo specifična mesta, kjer se nahaja ACC-oksidaza, predvsem na bazi ploda in v predelu žil v plodu ter v peclju ploda. Z uporabo različnih pufrov v postopku povrnitve antigenov smo opazili razlike v jakosti specifičnega obarvanja in količini nespecifičnega barvanja ozadja. Najmočnejši specifičen signal in hkrati najmanj nespecifično barvanje ozadja smo dobili z uporabo citratnega pufra pH 6 v postopku povrnitve antigenov. Kontrolne preparate smo barvali z uporabo neimunega seruma namesto z specifičnimi primarnimi protitelesi. V kontrolnih preparatih nismo zaznali specifičnega obarvanja.20182018-10-04 18:38:57Diplomsko delo/naloga104277sl