Opredelitev imunogenosti gojenega limbalnega tkiva.Mikec, Špela (Avtor) Kopitar, Andreja Nataša (Mentor) roženicalimbalne epitelijske matične celicepomanjkanje limbalnih epitelijskih matičnih celicgojeno limbalno tkivoeksplantna tehnikaamnijska membranaLimbalne epitelijske matične celice (LEMC) se nahajajo v roženičnem limbusu in omogočajo obnovo roženičnega epitelija. Okvara in pomanjkanje teh celic vodi v boleznsko stanje. Eden od načinov zdravljenja pomanjkanja LEMC je s presaditvijo vzgojenega limbalnega tkiva v kulturi. Določali smo imunogenost gojenega roženičnega tkiva iz keratolimbalnih eksplantov kadavrskih roženic do tretje pasaže na plastiki in intaktni amnijski membrani (AM). S pretočno citometrijo smo določali prisotnost dveh podtipov dendritičnih celic (DC), ki smo jih ločili po izražanju naslednjih označevalcev, za plazmacitoidne DC (pDC): CD123+, CD303+, CD11c-, in za mielodine DC (mDC): CD11c+, CD123-. Merili smo tudi izražanje molekule MHC II, kostimulatornih molekul CD80 in CD86 ter aktivacijske molekule CD83. Merili smo še izražanje molekul CK12 in ABCB5. Prve so značilne za populacijo zrelih epitelijskih roženičnih celic, druge pa za pa populacijo LEMC. Za vse parametre smo naredili modele napovedi povprečnih deležev po pasažah. Pri vseh parametrih se je izkazalo, da razlika med rastjo celic na plastiki in na AM za gojenje ni statistično značilna (p>0,05). Z višanjem pasaž smo opazili trend znižanja deleža pDC in mDC, vendar pa vrednosti niso bile statistično značilne. Trdimo lahko, da je padec števila zrelih epitelijskih roženičnih celic iz prve v drugo (p=0,007) in iz druge v tretjo pasažo (p=0,01) statistično značilen. Prav tako je statistično značilen padec LEMC iz prve v drugo pasažo (p=0,02). Glede na rezultate menimo, da je na obeh podlagah smiselno gojiti celice do vključno prve pasaže, tako dobimo tkivo, ki ima zadostno količino epitelijskih roženičnih celic, LEMC in zmanjšan delež mDC in pDC.[Š. Mikec]20182018-09-13 07:47:09Magistrsko delo/naloga103043sl