Kvantifikacija kombiniranega protiadhezijskega delovanja naravnih učinkovin na bakterije vrst Campylobacter jejuni in Listeria monocytogenes z metodami na osnovi PCRPretnar, Gaja (Avtor) Smole Možina, Sonja (Mentor) Klančnik, Anja (Komentor) Abramovič, Helena (Recenzent) patogene bakterijeCampylobacter jejuniListeria monocytogenesprotimikrobne snovikarvakroltimolα-pinenepigalokatehin galatprotiadhezivna učinkovitostadhezijamolekularne tehnikeabsolutna kvantifikacijaPCR v realnem časudigitalni PCRNaraščanje odpornosti patogenih bakterij na antibiotike ter odpornost biofilmskih oblik bakterij, ki so prisotne na abiotskih površinah v živilski industriji, predstavlja velik izziv pri zagotavljanju varne hrane. Trenutne raziskave so usmerjene v iskanje alternativnih učinkovin naravnega izvora in v mehanizem njihovega delovanja na bakterijske celice. Obenem je potreben razvoj hitrih, specifičnih in cenovno dostopnih metod za detekcijo in kvantifikacijo patogenih bakterij v živilskih proizvodnih obratih. V delu smo se osredotočili na adhezijsko sposobnost Gram negativnih bakterij C. jejuni in Gram pozitivnih bakterij L. monocytogenes ter optimizirali metodo za kvantifikacijo adheriranih bakterij. Z uporabo metode digitalnega PCR (dPCR) smo pripravili umeritveno krivuljo ter nadalje z uporabo metode PCR v realnem času (qPCR) določili število pomnožkov tarčne DNK, ki predstavlja premosorazmerno količino adheriranih bakterij na polistiren. Nato smo preverili protiadhezijsko učinkovitost naravnih učinkovin karvakrola, timola, α-pinena in epigalokatehin galata (EGKG) v subinhibitorni koncentraciji (0,1 mg/ ml). Posamezen dodatek karvakrola, timola in EGKG je inhibiral adhezijo za več kot 90 %. Več kot 99 % inhibicijo adhezije smo ugotovili pri kombiniranju karvakrola, timola in EGKG ter pri kombiniranju vseh štirih učinkovin. Naravne učinkovine predstavljajo alternativno strategijo pri preprečevanju adhezije bakterij ter posledično nastanka biofilma na abiotskih površinah.[G. Pretnar]20182018-06-17 07:45:02Magistrsko delo/naloga101573sl