izpis_h1_title_alt

Histokemijsko določanje ß-glukanov v zrnih ječmena
ID Keber, Urška (Avtor), ID Vogel-Mikuš, Katarina (Mentor) Več o mentorju... Povezava se odpre v novem oknu

URLURL - Predstavitvena datoteka, za dostop obiščite http://pefprints.pef.uni-lj.si/5867/ Povezava se odpre v novem oknu

Izvleček
Ječmen je eno od najstarejših žit na svetu in spada v botanično družino trav (Poaceae). Glavna gradbena komponenta notranjega dela celičnih sten škrobnega endosperma so (1→3),(1→4)-β-D-β-glukani. To so linearni polisaharidi, ki spadajo v skupino prehranskih vlaknin in so pomemben del človekove prehrane. Glavni nalogi β-glukanov sta stabilizacija rastlinske celične stene ter mobilizacija nastale energije pri njihovi hidrolizi. Namena našega raziskovalnega dela sta bila histokemijska lokalizacija β-glukanov v zrnu ječmena ter ovrednotenje intenzitete fluorescence pri štirih vrstah ječmena kot osnova za semi-kvantitativno določanje vsebnosti beta glukanov. Kot izhodni material smo vzeli po nekaj zrn treh različnih sort ječmena z že znanimi vsebnostmi β-glukanov ter nekaj zrn sorte ječmena z neznano vsebnostjo β-glukanov. Vzorce smo s tehniko zamrzovanja in odmrzovanja (angl. freeze-thaw) pripravili za rezanje in barvanje. Pri barvanju smo uporabili dve fluorescentni barvili, kalkofluor beli (Sigma-Aldrich) in fluorestentni osvetljevalec 28 (Sigma-Aldrich), ki se vežeta na β-1,3 in β-1,4 polisaharide. Ugotovili smo, da se β-glukani nahajajo znotraj zrna ječmena, natančneje v škrobnem endospermu in alevronski plasti. Na slikah pobarvanih rezin vzorcev smo pomerili intenziteto fluorescence s programom ImageJ. S pomočjo povprečnih vrednosti intenzitete fluorescence smo izdelali umeritveno krivuljo, s pomočjo katere smo določili vsebnost β-glukanov v zrnu ječmena z neznano vsebnostjo β-glukanov. Zaključimo lahko, da je histokemijska metoda primerna za semi-kvantitativno določanje količine β-glukanov v zrnih ječmena, pri čemer jih lahko razdelimo v razrede z manjšo, srednjo in veliko vsebnostjo β-glukanov.

Jezik:Slovenski jezik
Ključne besede:ječmen
Vrsta gradiva:Diplomsko delo/naloga
Tipologija:2.11 - Diplomsko delo
Organizacija:PEF - Pedagoška fakulteta
Leto izida:2019
PID:20.500.12556/RUL-108846 Povezava se odpre v novem oknu
COBISS.SI-ID:12534089 Povezava se odpre v novem oknu
Datum objave v RUL:20.08.2019
Število ogledov:1059
Število prenosov:197
Metapodatki:XML DC-XML DC-RDF
:
Kopiraj citat
Objavi na:Bookmark and Share

Sekundarni jezik

Jezik:Angleški jezik
Naslov:Histochemical determination β-glucans in barley grains
Izvleček:
Barley is one of the oldest cultivated cereals in the world and is classified as a botanical member of the grass family (Poaceae). The primary structural components in the cell wall interiors of the starchy endosperm are (1→3), (1→4)-β-D-β-glucans. They are linear polysaccharides that belong to the group of dietary fibres and are a crucial part of human nutrition. β-glucan’s primary functions are the stabilisation of a plant’s cell wall and the mobilisation of energy produced by its hydrolysis. Our research project’s goals were the histochemical localisation of β-glucans within the grain of barley and the evaluation of fluorescence intensity in four different barley types for the basis of quantitative determination of the content of β-glucans. For source material, we gathered a few grains from three different types of barley with known concentrations of β-glucans, and a few grains of a type of barley with an unknown concentration of β-glucans. The specimens were prepared for cutting and dyeing with the freeze-thaw technique. Dyeing was achieved with two fluorescent dyes; Calcofluor White (Sigma-Aldrich) and the Fluorescent Brightener 28 (Sigma-Aldrich), which bind to the β-1,3 and β-1,4 polysaccharides. We determined that the β-glucans are present within the grain of barley, specifically within the starchy endosperm and the aleurone layer. We measured the intensity of fluorescence on the images of dyed slice samples with the imageJ programme. With the help of the average values of fluorescence intensity, we created a measuring curve, which we used to determine the content of β-glucans in the grain of barley with an unknown content of β-glucans. We can conclude that the histochemical method is appropriate for semi-quantitative assessment of the β-glucan levels in grains of barley, which can then be classified into grades of fewer, medium, and higher β-glucan content.

Ključne besede:barley

Podobna dela

Podobna dela v RUL:
Podobna dela v drugih slovenskih zbirkah:

Nazaj